质粒构建
- 分类：蛋白制备
- 发布时间：2020-08-14 00:00:00
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概要:
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除非客户指定构建方式或文献中有充分记载，佰翱得会从四个主要表达宿主（细菌，酵母，昆虫细胞和哺乳动物细胞）中按照内部评估的结果，选择合适的方案表达重组蛋白。 我们提供了用于实现表达的质粒和细胞选择。下是我们可以尝试在大肠杆菌中进行表达的参数概述：
1. 筛选表达标签和载体
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N末端的标签 |
C末端的标签 |
载体 |
2. 筛选感受态
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BL21 (DE3) Rosetta (DE3) Origami 2 (DE3) C41 (DE3)orC43 (DE3) Arctic (DE3) Tuner(DE3)0.1mM IPTG BL21 (DE3) pLysS |
最常用的 稀有密码子 二硫键及稀有密码子 疏水性蛋白 TPN30 & TPN60 分子伴侣 为了得到更好的表达适当的降低表达量 降低毒性蛋白的本底表达 |
3. 筛选分子伴侣
pG-KJE8,pGro7, pKJE7, pGTf2,pTf16
Dsba和Dsbc（用pET21a载体在细胞周质空间中表达）
