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“解密”帕金森病药靶的结构 — 佰翱得提供高质量全长LRRK2蛋白

“解密”帕金森病药靶的结构 — 佰翱得提供高质量全长LRRK2蛋白

  • 分类:News
  • 作者:
  • 来源:
  • 发布时间:2020-06-05
  • 访问量:0

【概要描述】帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)是第二大最常见的神经退化性运动障碍疾病。在65岁以上的人群中约有1-2%的人受此病影响。目前尚无有效的帕金森氏病的治疗方法。蛋白激酶Leucine-richrepeatkinase2(LRRK2)与帕金森病的病理有高度关联性,也是帕金森病药物治疗中最有希望的药靶之一。现在有几种LRRK2抑制剂正处于临床试验阶段。 LRRK2是一种大型多结构域蛋白,具有2527个氨基酸(分子量:286kDa),由armadillorepeats(ARM),ankyrinrepeats(ANK),leucine-richrepeats(LRR),Rasofcomplex(ROC),C-terminalofROC(COR),kinasedomain(KD)和WD40domain组成,以二聚体形式存在。尽管高分辨的三维结构在LRRK2的机理阐明和药物发现中具有重要意义,但由于表达和纯化困难,全长LRRK2的高分辨率三维结构一直难以得到测定。   冷冻电镜(cryoEM)是一种新兴的可以获得高分辨率蛋白结构的强大方法。近年来,佰翱得一直致力于制备能满足冷冻电镜结构测定需求的高纯度、高质量的LRRK2蛋白。我们尝试了多种方法和条件,诸如真核细胞表达系统和蛋白标签的选择,表达和纯化方案,冷冻电镜样品条件筛选等等。迄今,我们已经成功表达纯化了高质量的全长二聚体LRRK2蛋白,从而为高分辨率冷冻电镜结构研究以及功能性检测奠定了坚实的基础。欢迎学术界和工业界的研究人员与我们联系,以获取高质量的全长LRRK2蛋白,并进而获得其高精度的三维结构信息,包括LRRK2与其抑制剂的复合物的结构信息。 图一.SDS-凝胶电泳胶图:全长LRRK2蛋白的纯化 FLAG标记的LRRK2,由转染HEK293细胞表达,经亲和层析和凝胶过滤纯化。(M=分子量标记;泳道1=全细胞蛋白;泳道2=沉淀;泳道3=上清液;泳道4=亲和柱的穿透峰;泳道5=亲和柱的缓冲液洗涤;泳道6=从亲和柱上洗脱的LRRK2蛋白。   图二:全长LRRK2颗粒的电镜图像 在FEITF20200kV显微镜下的LRRK2负染图像,醋酸铀(UA)染色。圈出的单颗粒显示了全长LRRK2的紧凑和特征性图像。

“解密”帕金森病药靶的结构 — 佰翱得提供高质量全长LRRK2蛋白

【概要描述】帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)是第二大最常见的神经退化性运动障碍疾病。在65岁以上的人群中约有1-2%的人受此病影响。目前尚无有效的帕金森氏病的治疗方法。蛋白激酶Leucine-richrepeatkinase2(LRRK2)与帕金森病的病理有高度关联性,也是帕金森病药物治疗中最有希望的药靶之一。现在有几种LRRK2抑制剂正处于临床试验阶段。 LRRK2是一种大型多结构域蛋白,具有2527个氨基酸(分子量:286kDa),由armadillorepeats(ARM),ankyrinrepeats(ANK),leucine-richrepeats(LRR),Rasofcomplex(ROC),C-terminalofROC(COR),kinasedomain(KD)和WD40domain组成,以二聚体形式存在。尽管高分辨的三维结构在LRRK2的机理阐明和药物发现中具有重要意义,但由于表达和纯化困难,全长LRRK2的高分辨率三维结构一直难以得到测定。   冷冻电镜(cryoEM)是一种新兴的可以获得高分辨率蛋白结构的强大方法。近年来,佰翱得一直致力于制备能满足冷冻电镜结构测定需求的高纯度、高质量的LRRK2蛋白。我们尝试了多种方法和条件,诸如真核细胞表达系统和蛋白标签的选择,表达和纯化方案,冷冻电镜样品条件筛选等等。迄今,我们已经成功表达纯化了高质量的全长二聚体LRRK2蛋白,从而为高分辨率冷冻电镜结构研究以及功能性检测奠定了坚实的基础。欢迎学术界和工业界的研究人员与我们联系,以获取高质量的全长LRRK2蛋白,并进而获得其高精度的三维结构信息,包括LRRK2与其抑制剂的复合物的结构信息。 图一.SDS-凝胶电泳胶图:全长LRRK2蛋白的纯化 FLAG标记的LRRK2,由转染HEK293细胞表达,经亲和层析和凝胶过滤纯化。(M=分子量标记;泳道1=全细胞蛋白;泳道2=沉淀;泳道3=上清液;泳道4=亲和柱的穿透峰;泳道5=亲和柱的缓冲液洗涤;泳道6=从亲和柱上洗脱的LRRK2蛋白。   图二:全长LRRK2颗粒的电镜图像 在FEITF20200kV显微镜下的LRRK2负染图像,醋酸铀(UA)染色。圈出的单颗粒显示了全长LRRK2的紧凑和特征性图像。

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  • 发布时间:2020-06-05
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帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是第二大最常见的神经退化性运动障碍疾病。在65岁以上的人群中约有1-2%的人受此病影响。目前尚无有效的帕金森氏病的治疗方法。蛋白激酶Leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2)与帕金森病的病理有高度关联性,也是帕金森病药物治疗中最有希望的药靶之一。现在有几种LRRK2抑制剂正处于临床试验阶段。
 
LRRK2是一种大型多结构域蛋白,具有2527个氨基酸(分子量:286kDa),由armadillo repeats (ARM), ankyrin repeats (ANK), leucine-rich repeats (LRR), Ras of complex (ROC), C-terminal of ROC (COR), kinase domain (KD)和WD40 domain组成,以二聚体形式存在。尽管高分辨的三维结构在LRRK2的机理阐明和药物发现中具有重要意义,但由于表达和纯化困难,全长LRRK2的高分辨率三维结构一直难以得到测定。
 
  冷冻电镜(cryoEM)是一种新兴的可以获得高分辨率蛋白结构的强大方法。近年来,佰翱得一直致力于制备能满足冷冻电镜结构测定需求的高纯度、高质量的LRRK2蛋白。我们尝试了多种方法和条件,诸如真核细胞表达系统和蛋白标签的选择,表达和纯化方案,冷冻电镜样品条件筛选等等。迄今,我们已经成功表达纯化了高质量的全长二聚体LRRK2蛋白,从而为高分辨率冷冻电镜结构研究以及功能性检测奠定了坚实的基础。欢迎学术界和工业界的研究人员与我们联系,以获取高质量的全长LRRK2蛋白,并进而获得其高精度的三维结构信息,包括LRRK2与其抑制剂的复合物的结构信息。
 
图一. SDS-凝胶电泳胶图:全长LRRK2蛋白的纯化
 
FLAG标记的LRRK2,由转染HEK293细胞表达,经亲和层析和凝胶过滤纯化。(M = 分子量标记; 泳道1 =全细胞蛋白;泳道2 =沉淀;泳道3 =上清液;泳道4 =亲和柱的穿透峰; 泳道5 =亲和柱的缓冲液洗涤; 泳道6 =从亲和柱上洗脱的LRRK2蛋白。
 
帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是第二大最常见的神经退化性运动障碍疾病。在65岁以上的人群中约有1-2%的人受此病影响。目前尚无有效的帕金森氏病的治疗方法。蛋白激酶Leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2)与帕金森病的病理有高度关联性,也是帕金森病药物治疗中最有希望的药靶之一。现在有几种LRRK2抑制剂正处于临床试验阶段。    LRRK2是一种大型多结构域蛋白,具有2527个氨基酸(分子量:286kDa),由armadillo repeats (ARM), ankyrin repeats (ANK), leucine-rich repeats (LRR), Ras of complex (ROC), C-terminal of ROC (COR), kinase domain (KD)和WD40 domain组成,以二聚体形式存在。尽管高分辨的三维结构在LRRK2的机理阐明和药物发现中具有重要意义,但由于表达和纯化困难,全长LRRK2的高分辨率三维结构一直难以得到测定。    冷冻电镜(cryoEM)是一种新兴的可以获得高分辨率蛋白结构的强大方法。近年来,佰翱得一直致力于制备能满足冷冻电镜结构测定需求的高纯度、高质量的LRRK2蛋白。我们尝试了多种方法和条件,诸如真核细胞表达系统和蛋白标签的选择,表达和纯化方案,冷冻电镜样品条件筛选等等。迄今,我们已经成功表达纯化了高质量的全长二聚体LRRK2蛋白,从而为高分辨率冷冻电镜结构研究以及功能性检测奠定了坚实的基础。欢迎学术界和工业界的研究人员与我们联系,以获取高质量的全长LRRK2蛋白,并进而获得其高精度的三维结构信息,包括LRRK2与其抑制剂的复合物的结构信息。    图一. SDS-凝胶电泳胶图:全长LRRK2蛋白的纯化    FLAG标记的LRRK2,由转染HEK293细胞表达,经亲和层析和凝胶过滤纯化。(M = 分子量标记; 泳道1 =全细胞蛋白;泳道2 =沉淀;泳道3 =上清液;泳道4 =亲和柱的穿透峰; 泳道5 =亲和柱的缓冲液洗涤; 泳道6 =从亲和柱上洗脱的LRRK2蛋白。             图二:全长LRRK2颗粒的电镜图像    在FEI TF20 200kV显微镜下的LRRK2负染图像,醋酸铀(UA)染色。 圈出的单颗粒显示了全长LRRK2的紧凑和特征性图像。
  
图二:全长LRRK2颗粒的电镜图像
 
在FEI TF20 200kV显微镜下的LRRK2负染图像,醋酸铀(UA)染色。 圈出的单颗粒显示了全长LRRK2的紧凑和特征性图像。
 
帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是第二大最常见的神经退化性运动障碍疾病。在65岁以上的人群中约有1-2%的人受此病影响。目前尚无有效的帕金森氏病的治疗方法。蛋白激酶Leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2)与帕金森病的病理有高度关联性,也是帕金森病药物治疗中最有希望的药靶之一。现在有几种LRRK2抑制剂正处于临床试验阶段。    LRRK2是一种大型多结构域蛋白,具有2527个氨基酸(分子量:286kDa),由armadillo repeats (ARM), ankyrin repeats (ANK), leucine-rich repeats (LRR), Ras of complex (ROC), C-terminal of ROC (COR), kinase domain (KD)和WD40 domain组成,以二聚体形式存在。尽管高分辨的三维结构在LRRK2的机理阐明和药物发现中具有重要意义,但由于表达和纯化困难,全长LRRK2的高分辨率三维结构一直难以得到测定。    冷冻电镜(cryoEM)是一种新兴的可以获得高分辨率蛋白结构的强大方法。近年来,佰翱得一直致力于制备能满足冷冻电镜结构测定需求的高纯度、高质量的LRRK2蛋白。我们尝试了多种方法和条件,诸如真核细胞表达系统和蛋白标签的选择,表达和纯化方案,冷冻电镜样品条件筛选等等。迄今,我们已经成功表达纯化了高质量的全长二聚体LRRK2蛋白,从而为高分辨率冷冻电镜结构研究以及功能性检测奠定了坚实的基础。欢迎学术界和工业界的研究人员与我们联系,以获取高质量的全长LRRK2蛋白,并进而获得其高精度的三维结构信息,包括LRRK2与其抑制剂的复合物的结构信息。    图一. SDS-凝胶电泳胶图:全长LRRK2蛋白的纯化    FLAG标记的LRRK2,由转染HEK293细胞表达,经亲和层析和凝胶过滤纯化。(M = 分子量标记; 泳道1 =全细胞蛋白;泳道2 =沉淀;泳道3 =上清液;泳道4 =亲和柱的穿透峰; 泳道5 =亲和柱的缓冲液洗涤; 泳道6 =从亲和柱上洗脱的LRRK2蛋白。             图二:全长LRRK2颗粒的电镜图像    在FEI TF20 200kV显微镜下的LRRK2负染图像,醋酸铀(UA)染色。 圈出的单颗粒显示了全长LRRK2的紧凑和特征性图像。

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